Hva er forskjellen mellom normal fase og omvendt fase høyytelses væskekromatografi?
Hva er forskjellen mellom normal fase og omvendt fase høyytelses væskekromatografi?
Normal fase
HPLC-systemer med normal fase ligner på flash-kolonnekromatografi som du kanskje er kjent med.
En stasjonær silisiumfase elueres med et ikke-polært løsningsmiddel slik som heksan, eller en ganske upolær løsningsmiddelblanding slik som 2-propanol i heksaner. Ved normalfasekromatografi brukes bare organiske løsningsmidler.
I normalfasen eluerer polare molekyler sakte, og ikke-polære (fettete) molekyler eluerer raskt.
Omvendt fase
Omvendt fase er egentlig det motsatte av normal fase .
En ikke-polær stasjonær fase (ofte silisiumdioksyd der de frie hydroksylgruppene er endedekket med noe fettete, C18-kjeder er vanlige, men mange mange varianter er mulige) elueres med et polært løsningsmiddel som acetonitril / metanol, eller en ganske polær løsemiddelblanding (acetonitrilvannblandinger er vanlige, eller metanolvannblandinger).
I motsatt fase eluerer polare molekyler raskt, og ikke-polære (fettete) molekyler eluerer sakte.
Normal fase HPLC betyr at den stasjonære fasen er polær og den mobile fasen er upolær; omvendt fase betyr at den stasjonære fasen er ikke-polær og den mobile fasen er polær.
Se HPLC-separasjonsmoduser (fra Waters, en produsent av kromatografiutstyr og rekvisita) for mer innsikt .